The influence of glycerol upon L. reuteri activity against enteropathogens / A influência do glicerol sobre a atividade de L. Reuteri contra enteropatógenos

BACKGROUND: Probiotics containing L. reuteri are popular for treating and preventing bacterial gastrointestinal infections. L. reuteri, produces reuterin, an antibiotic that inhibits gram-negative bacteria. Reuterin production is the result of glycerol fermentation by L reuteri. Although L. reuteri is normally present in the gastrointestinal system, only small amounts of glycerol are usually available; therefore, the production of reuterin may not occur and this could reduce the effectiveness of the probiotic supplement. Our objective is to identify the minimum concentrations of glycerol required for L. reuteri to exert an inhibitory effect on enteropathogenic enterobacteriaceae. METHOD: Samples containing 10(8) colony forming units (CFU) of L. reuteri DSM17938 (Colikids®, Ache, Brazil/BioGaia, Sweden) were grown with varying concentrations of glycerol (0.05-5%). 10(6) CFU of E.coli (CDC0126/INCQS/FIOCRUZ), Shigella flexneri (ATCC/120022), S. enterica (ATCC6539) and Y. enterocolitica (ATCC9610) were inoculated with L. reuteri in the different glycerol concentrations. Each enterobacteria and glycerol 5% without L. reuteri cultures were used as positive control groups. RESULTS: All bacteria were completely inhibited at higher ranges of glycerol concentrations (0.2-5%) and grew at lower concentrations (0.05-0.1%). CONCLUSION: L. reuteri requires at least 0.2% of glycerol to completely inhibit enterobacterial growth. These preliminary findings may influence the current method of use of probiotic supplements. The antibiotic activity of L. reuteri may have potential clinical use against important enteropathogens.

CONTEXTO: Os probióticos que contêm L. reuteri são populares para tratar e prevenir infecções bacterianas do trato gastrointestinal. L. reuteri produz reuterina, um antibiótico que inibe bactérias gram-negativas. A produção de reuterina depende da presença de quantidades adequadas de glicerol, cuja fermentação resulta na produção do antibiótico. Embora L. reuteri esteja normalmente presente no sistema GI, apenas pequenas quantidades de glicerol estão geralmente disponíveis; portanto, a produção de reuterina pode não ocorrer o que poderia reduzir a eficácia do suplemento probiótico. Nosso objetivo é identificar as concentrações mínimas de glicerol necessárias para que L. reuteri exerça um efeito inibitório nas enterobacteriaceas enteropatogênicas. MÉTODO: 108 CFU de L. reuteri DSM17938 (Colikids®, Ache, Brasil / BioGaia, Suécia) cresceu com concentrações variáveis de glicerol (0,05-5%). Foram inoculadas 106 UFC de E. coli (CDC0126 / INCQS / FIOCRUZ), Shigella flexneri (ATCC / 120022), S. enterica (ATCC6539) e Y. enterocolitica (ATCC9610) com L. reuteri nas diferentes concentrações de glicerol. Cada enterobacteria e glicerol 5% sem culturas de L. reuteri foram utilizadas como grupos de controle positivo. RESULTADOS: Todas as bactérias foram completamente inibidas em maiores concentrações de glicerol (0.2-5%) e cresceram em concentrações mais baixas (0.05-0.1%). CONCLUSÃO: L. reuteri requer pelo menos 0,2% de glicerol para inibir completamente o crescimento de enterobacteria. Essas descobertas preliminares podem influenciar o método atual de uso de suplementos de probióticos. A atividade antibiótica de L. reuteri pode ter potencial uso clínico contra importantes enteropatógenos.

National prevalence survey in Brazil to evaluate the quality of microbiology laboratories: the importance of defining priorities to allocate limited resources / Encuesta de prevalencia nacional para evaluar la calidad de los laboratorios de microbiología en el Brasil: importancia de la definición de prioridades para asignar recursos limitados

This report describes a survey of microbiology laboratories (n = 467) serving Brazilian hospitals with >10 intensive care beds and/or involved in the government health care adverse event reporting system. Coordinators were interviewed and laboratories classified as follows: Level 0 (no minimal functioning conditions-85.4% of laboratories); Level 1 (minimal functioning conditions but inadequate execution of basic routine-6.7%); Level 2 (minimal functioning conditions and adequate execution of basic routine but no adequate procedures for quality control-5.8%); Level 3 (minimal functioning conditions, adequate execution of basic routine, and adequate procedures for quality control, but no direct communication with the infection control department-0.9%); Level 4 (minimal functioning conditions, adequate execution of basic routine, adequate procedures for quality control, and direct communication with infection control, but no available advanced resources-none); and Level 5 (minimal functioning conditions, adequate execution of basic routine, adequate procedures for quality control, direct communication with infection control, and available advanced resources-0.9%). Twelve laboratories did not perform Ziehl-Neelsen staining; 271 did not have safety cabinets; and >30% without safety cabinets had automated systems. Low quality was associated with serving hospitals not participating in government adverse-event program; private hospitals; nonteaching hospitals; and those outside state capitals. Results may reflect what occurs in many other countries where defining priorities is important due to limited resources.

Este artículo describe una encuesta realizada en Brasil en laboratorios de microbiología (n = 467) que prestaban servicio a hospitales que contaban al menos con 10 camas de cuidados intensivos. Se entrevistó a los coordinadores y los laboratorios se clasificaron de la siguiente manera: nivel 0 (sin condiciones de funcionamiento mínimas: 85,4% de los laboratorios), nivel 1 (condiciones de funcionamiento mínimas pero ejecución inadecuada del trabajo habitual básico: 6,7%), nivel 2 (condiciones de funcionamiento mínimas y ejecución adecuada del trabajo habitual básico, pero sin procedimientos de control de calidad apropiados: 5,8%), nivel 3 (condiciones de funcionamiento mínimas, ejecución adecuada del trabajo habitual básico y procedimientos de control de calidad apropiados, pero sin comunicación directa con el departamento de control de infecciones: 0,9%), nivel 4 (condiciones de funcionamiento mínimas, ejecución adecuada del trabajo habitual básico, procedimientos de control de calidad apropiados y comunicación directa con el departamento de control de infecciones, pero sin recursos avanzados disponibles: ningún laboratorio) y nivel 5 (condiciones de funcionamiento mínimas, ejecución adecuada del trabajo habitual básico, procedimientos de control de calidad apropiados, comunicación directa con el departamento de control de infecciones y recursos avanzados disponibles: 0,9%). Doce laboratorios no realizaban la tinción de Ziehl-Neelsen, 271 no contaban con cámaras de seguridad biológica, y más de 30% de los laboratorios que carecían de cámaras de seguridad biológica tenían sistemas automatizados. La escasa calidad se asoció a la falta de participación en el programa gubernamental de notificación de acontecimientos adversos, a los hospitales privados, a los hospitales no docentes y a la ubicación de los hospitales fuera de las capitales de los estados. Los resultados pueden reflejar lo que ocurre en muchos otros países con recursos limitados, donde es importante definir las prioridades.

Pseudomonas aeruginosa multirresistente: um problema endêmico no Brasil / Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa: an endemic problem in Brazil

Relatos mundiais têm documentado a problemática da endemicidade de isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa multirresistente (MDR) aliada a elevados índices de morbidade/mortalidade. No Brasil, surtos de infecção ocasionados por P. aeruginosa têm sido relacionados com uma disseminação clonal da espécie. Atualmente, as opções terapêuticas para o tratamento das infecções causadas por esse microrganismo são limitadas, muitas vezes restringindo-se ao uso de carbapenêmicos (p. ex., imipenem [IPM]). Assim, a resistência ao IPM é uma questão de saúde pública, uma vez que esse antibiótico é empregado como último recurso no tratamento de infecções de origem hospitalar, causadas por bactérias Gram-negativas multirresistentes. No Brasil, os principais mecanismos relacionados com fenótipos multirresistentes de P. aeruginosa são produção de metalobetalactamase (MBL) do tipo SPM-1, presença de metilase 16S rRNA RmtD, perda de porina OprD e superexpressão de bombas de efluxo, o que pode explicar os altos índices de resistência a carbapenêmicos e aminoglicosídeos. A emergência de cepas com essas características é preocupante, tendo em vista a escassez de terapias efetivas no tratamento de infecções por esse patógeno. Finalmente, com base em relatos nacionais, publicados por diferentes grupos de pesquisa, podemos deduzir que a convergência de múltiplos mecanismos de resistência em P. aeruginosa tem sido um evento favorável para a seleção de diferentes clones endêmicos multirresistentes disseminados no Brasil.

Global reports have documented the endemicity of multidrug-resistant (MDR) Pseudomonas aeruginosa associated with high levels of morbidity/mortality. In Brazil, outbreaks of MDR P. aeruginosa have been related to clonal dissemination. Currently, therapeutic options for the treatment of these infections are restricted to carbapenemic antibiotics (i.e., imipenem [IPM]). Thus, carbapenem resistance is a public health issue, since carbapenems are considered the last resort to nosocomial infections caused by MDR Gram-negative bacteria. In Brazil, the main mechanisms associated with MDR P. aeruginosa phenotypes are metallo-betalactamase (MBL) production (SPM-1 enzyme), presence of 16S rRNA methylase RmtD, loss of OprD porin, and overexpression of efflux pumps, which may explain the high level of carbapenem and aminoglycoside resistance. Accordingly, the emergence and dissemination of MDR strains is worrisome. Finally, based on national reports published by different groups of investigators, it is deduced that the convergence of multiple mechanisms of P. aeruginosa resistance has played a major role in the selection of endemic MDR clones widespread in Brazil.

Characterization of the Brazilian endemic clone of methicillin-resistant staphylococcus aureus (MRSA) from hospitals throughout Brazil

The objective of this study was to characterize patterns of the Brazilian endemic clone of methicillin-resistant staphylococcus aureus (MRSA) from hospitals throughout Brazil. We studied 83 MRSA strains isolated from patients hospitalized in 27 public and private hospitals in 19 cities located in 14 brazilian states from september, 1995, to june, 1997. The MRSA strains were typed using antibiograms, bacteriophage typing and pulsed field gel electrophoresis (PFGE). The analysis of genomic DNA by PFGE showed that 65 isolates presented the same SFGE pattern. This pattern was presente in all of the hospitals studied indicating the presence of an endemic MRSA clone widely disseminated throughout brazilian hospitals (BEC). All isolates belonging to the BEC proved to be resistant to ciprofloxacin, erythromycin, lincomycin, trimethoprim-sulphamethoxazole, and tetracycline. Variable susceptibility to these drugs was found only in isolates belonging to clones other than the BEC. The results show that, among MRSA, the BEC is common in Brazil. The best method for mapping changes in the frequency of this clone among MRSA is pulsed field gel electrophoresis. Use of molecular mapping is an important tool for monitoring the spread of potentially dangerous microbes.

Estudo do perfil de resistência de 626 cepas de Staphylococcus aureus isolados de 25 hospitais brasileiros entre setembro de 1995 e junho de 1997 / Study of the resistance profile of 626 strains of staphylococcus aureus isolated in 25 Brazilian Hospitals from September/95 do June/97

O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil de resistência de cepas de Staphylococcus aureus isoladas de várias regiöes do Brasil. Foram estudadas 626 cepas provenientes de 25 hospitais, como mais de 250 leitos, localizados em 14 estados. O antibiograma foi realizado do método de difusäo de discos (kirby-Bauer), utilizando 12 antibióticos. As cepas oxacilino-resistentes (Orsa) foram também testadas empregando a técnica de microdiluiçäo em caldo por meio do Sistema MicroScan-Baxter Inc. Das 626 cepas enviadas, 388 foram oxacilino-sensíveis (Ossa) e 238 Orsa. Dentre as cepas Ossa, os percentuais de resistência encontrados foram: penicilina (87,1 por cento), eritromicina (16,2), tetraciclina (15,7), lincomicina (7,5), cloranfenicol (3,1), rifampicina (1,6), sulfametoxazol (SUT) (0,8 por cento), netilmicina (0,5) e ciprofloxacina (0,03). Dentre as cepas Orsa, 99,6 foram resistentes à eritromicina, lincomicina e tetraciclina, 96,2 ao SUT, 2 por cento à ciprofloxacina, 73,1 ao cloranfenicol, 71 à netilmicina e 22,7 à rifampicina. Todas as amostras foram sensíveis à vancomicina. As cepas de S. aureus isoladas no Brasil apresentam níveis mais elevados de resistência que os relatos em outros países. Ciprofloxacina, eritromicina, tetraciclina, lincomicina e SUT foram os antibióticos que apresentaram os mais elevados níveis de resistência. As elevadas taxas de resistência poderiam ser conseqüencia do uso em larga escala de antibióticos, que teria contribuído para a seleçäo de clones mutirresistentes

Staphylococcus aureus apresentando resistência intermediária à vacomicina: mecanismos de resistência, detecçäo laboratorial e perspectivas de emergência no Brasil / Staphylococcus aureus with intermediate resistance to vancomycin: mechanisms of resistance laboratory detection and perspectives of apperance in Brazil

O isolamento de cepas de Staphylococcus aureus com sensibilidade intermediária à vancomicina (VISA) foi relatado a partir de 1997 no Japäo, nos EUA e na França. Todas as cepas Visa foram resistentes à oxacilina (Orsa) e apresentaram valores de CIM > ou = 8µg/ml para vancomicina. Cepas hetero-Visa foram definidas como aquelas que apresentaram o fenômeno Visa na freqüência de 10 elevado a menos 6 ou mais em uma populaçäo bacteriana. Entretanto, os métodos tradicionais de determinaçäo da sensibilidade aos antimicrobianos, como técnica de difusäo com discos e alguns métodos automatizados, näo säo capazes de detectar corretamente estas estirpes. Assim, cepas hetero-Visa e Visa podem näo ser identificadas pela maioria dos laboratórios de rotina. No Brasil, ainda näo existe relato de isolamento destas cepas. Contudo, devido à elevada prevalência de cepas Orsa e, conseqüentemente, ao elevado uso de vancomicina, existe um risco em potencial para o surgimento de cepas hetero-Visa e Visa

Acinetobacter baumannii: importância clínica e diagnóstico laboratoirial / Acinetobacter baumannii: clinical importance and laboratorial diagnosis

O Acinetobacter baumannii é um importante agente causador de infecçöes hospitalares e tem se caracterizado por apresentar resistência a diversos agentes antimicrobianos. Esta bctéria desempenha papel significativo na colonizaçäo e infecçäo em pacientes hospitalzados, principalmente naqueles internados em unidades de terapia intensiva e com graves doenças de base. Vários mecanismos de resistência a antimicrobianos têm sido reconhecidos nesta bactéria e, geralmente, associaçöes antibióticas säo utilizadas no tratamento de infecçöes hospitalares por esta bactéria

Estudo comparativo da atividade in vitro da apicilina/sulbactam e outros agentes antimicrobianos frente a bactérias isoladas de diversos materiais clínicos / Comparative study of in vitro activity of ampicillin/sulbactam and other antimicrobics aginst bacteria isolated from several clinical specimens

Um total de 4.813 amostras bacterians, recentemente isoladas de diferentes materiais clínicos, foram testadas frente a 33 diferentes antimicrobianos, pelo método da difusão e disco e analisados de acordo com os padrões estabelecidos pelo National Commitee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Os resultados mostraram que a Ampicilina/Sulbactam apresentou uma ação extremamente eficaz frente à grande maioria das bactérias estudadas, 92,16 por cento de amostras sensíveis, quando comparado com a Ampicilina (54,63 por cento) e com os demais antimicrobianos testados. A Ampiclilina/Sulbactam mostrou-se também bastante eficiente frente a microorganismos fastidiosos, como o H. influenzae e N. gonorrhoeae, com 100 por cento das amostras testadas sensíveis. Concluímos que a Ampicilina/Sulbactam é um antibiótico com potente atividade "in vitro" frente às bactérias mais comumente isoladas de processos infecciosos.

Meningite criptocócica: aspectos clínicos, evolutivos e histopatológicos segundo a condiçäo predisponente / Cryptococcus meningitis: clinical course, development and histopathologic aspects depending on the predisposing factors

Dezessete casos consectivos de meningite criptocócica foram analisados depois de divididos em 3 grupos: I. três paciente sem imunodeficiência; II. seis pacientes com doença primária: neoplasia (3), diabetes (2) e alcoolismo (1); III. oito pacientes que desenvolveram criptococose depois de 18 a 67 meses de submetidos a transplante renal e imunossupressäo medicamentosa. A duraçäo mediana da sintomatologia antes do diagnóstico foi maior no Grupo II (53 dias) do que nos Grupos I (25 dias) ou III (28 dias). Rigidez de nuca, compromemento de pares cranianos e papiledema foram mais comuns no Grupo I do que nos Grupos II ou III, mas febre e sinais neurológicos focais foram observados apenas nos doentes destes últimos grupos. Apesar do predomínio de linfócitos na maioria dos casos, foi mais freqüente nos pacientes com rim transplantado a presença de neutrófilos no líquor cefalorraquiano. A mortalidade tardia foi maior nos pacientes com doença primária e, dos casos que receberam tratamento antifúngico efetivo, tiveram melhor prognóstico os pacientes com transplante renal. Encontrou-se o criptococo nos tecidos dos 8 casos necropsiados, notando-se também a formaçäo de granulomas, exceto em doentes do Grupo II. As diferenças observadas entre os Grupos sugerem que o quadro clínico, a evoluçäo e os achados necroscópicos da meningite criptocócica säo modificados de acordo com o tipo de imunodeficiência do paciente